【核因子κB受體活化因子配基(RANKL)簡(jiǎn)介】：是一種由TNFSF基因編碼的蛋白質(zhì)。RANKL為腫瘤壞死因子超家族的一員，屬于第二型穿膜蛋白。可以影響免疫系統(tǒng)和調(diào)控骨質(zhì)新生和重塑。RANKL在骨骼的新陳代謝方面，扮演著相當(dāng)重要的角色。他是造骨細(xì)胞（osteoblast）膜上的一種膜蛋白，可以活化蝕骨細(xì)胞，會(huì)加速蝕骨細(xì)胞破壞骨質(zhì)并被吸收，為骨質(zhì)更新的重要一環(huán)。當(dāng)造骨細(xì)胞膜上的RANKL，活化了蝕骨細(xì)胞膜上的RANK蛋白，蝕骨作用就會(huì)開(kāi)始。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中小鼠核因子κB受體活化因子配基的含量。凡訂購(gòu)我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，歡迎咨詢(xún)、訂購(gòu)！

檢測(cè)前準(zhǔn)備工作：

1. 請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液?？蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃

3. 20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1：20稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

注意：我司ELISA試劑盒中每個(gè)試劑都有穩(wěn)定體系的作用，請(qǐng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作.

 小鼠核因子κB受體活化因子配基ELISA試劑盒組成及其配置：

樣品收集、處理及保存方法：小鼠核因子κB受體活化因子配基ELISA試劑盒

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法：可以采用各種繪圖軟件來(lái)繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

檢驗(yàn)結(jié)果的解釋?zhuān)?/strong>檢測(cè)完成后，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的吸光度（OD值）作為橫坐標(biāo)，利用計(jì)算機(jī)軟件，采用四參數(shù)Logistic曲線擬合（4-pl），創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，通過(guò)樣本的吸光度（OD值），利用方程計(jì)算樣品的濃度值。
如果樣品被稀釋?zhuān)ㄟ^(guò)上述方法測(cè)的的濃度值，要乘以稀釋倍數(shù)，才是樣品的zui終濃度。