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產(chǎn)品中心簡(jiǎn)要描述:軒澤康生物提供小鼠藍(lán)耳病抗體(PRRS-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù),快速檢測(cè)一周內(nèi)出結(jié)果。我司ELISA檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品種類齊全,為您提供全面技術(shù)咨詢服務(wù)和產(chǎn)品說(shuō)明書。試劑盒有質(zhì)量問(wèn)題我們無(wú)條件退換。歡迎咨詢、訂購(gòu)!
產(chǎn)品介紹
品牌 | 軒澤康 | 規(guī)格 | 96T,48T |
---|---|---|---|
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 僅用于科學(xué)研究,不得用于臨床 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 | 保質(zhì)期 | 6個(gè)月 |
保存條件 | 2-8℃ | 檢測(cè)方法 | 雙抗一步夾心法 |
檢測(cè)波長(zhǎng) | 450nm | 樣本類型 | 血清、血漿、細(xì)胞上清液等 |
特色服務(wù) | 免費(fèi)代測(cè),支持定制 |
檢測(cè)原理:試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被豬藍(lán)耳病(PRRS)病毒抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗原,經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中豬藍(lán)耳病抗體(PRRS-Ab)病毒的存在與否。
樣品收集、處理及保存方法:
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠藍(lán)耳病抗體(PRRS-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒組成:
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無(wú) |
陰性對(duì)照 | 0.5mL | 0.5mL | 無(wú) |
陽(yáng)性對(duì)照 | 0.5mL | 0.5mL | 無(wú) |
檢測(cè)抗原-HRP | 10mL | 5mL | 無(wú) |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋 |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
底物A | 6mL | 3mL | 無(wú) |
底物B | 6mL | 3mL | 無(wú) |
終止液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無(wú) |
說(shuō)明書 | 1份 | 1份 | 無(wú) |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無(wú) |
小鼠藍(lán)耳病抗體(PRRS-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔,陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50μL;
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加稀釋液40μL;
4. 隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗原100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
技術(shù)小提示:
1. 當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí),盡量避免起沫。
2. 為了避免交叉感染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽。
3. 每次孵育時(shí),請(qǐng)正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4. 混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無(wú)色,請(qǐng)避光保存;假如微孔板后,將由物色變成不同深度的藍(lán)色。
5. 終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致;加入終止液后,孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體未混勻;請(qǐng)充分混合。
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