【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A）的含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費代測服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

我司供應(yīng)種屬種類齊全：人、大小鼠、豬、雞、犬、猴、牛羊、雞鴨、藥殘類、植物、羊、豚鼠等。質(zhì)量可靠、靈敏度高、效果穩(wěn)定、易保存。同時免費提供產(chǎn)品最新報價、實驗原理、產(chǎn)品用途及中英文說明書。上海軒澤康生物擁有自己的實驗室（上海）和技術(shù)團隊，公司提供售前、售中、售后技術(shù)支持，為您解決實驗過程中遇到的問題。想要了解更多實驗代做服務(wù)，歡迎咨詢!

檢測原理:  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A（SP-A）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A（SP-A）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AELISA試劑盒性能：

準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0pg/mL。

特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AELISA試劑盒組成及其配置：

（ELISA試劑盒檢測范圍等數(shù)據(jù)，因檢測樣本 的不同而調(diào)整，實際數(shù)據(jù)以隨貨說明書為準。）

實驗材料與試劑配制：

1.  儀器與材料：酶標儀（使用前預熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。

2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

樣品收集、處理及保存：

【細胞培養(yǎng)上清】：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

【血清】：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。

【血漿】：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

 【體液】：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

 【樣本要求】：樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

 【樣本保存】：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-80 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

關(guān)于做ELISA標準曲線時需要注意的細節(jié)問題：

1. 設(shè)置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能覆蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度*陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。

2. 檢測標準樣品時，應(yīng)按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。

3. 標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點，但至少要保證有5個點。

4. 做出的標準曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎樱话銇碚f，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至時0.999.

5. 樣品的濃度等指標時根據(jù)標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作時比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結(jié)果無從談起。

6. *采用倍比稀釋法配置標準曲線中的標準品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。

ELISA檢測試劑盒優(yōu)勢:

1.     上海軒澤康生物擁有自己的實驗室和技術(shù)團隊，公司免費提供ELISA代測服務(wù)，并提供售前、售中、售后技術(shù)支持。為您解決實驗過程中遇到的問題，如需了解更多上海軒澤康生物代測服務(wù)，請咨詢或聯(lián)系相關(guān)客服。

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