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產(chǎn)品中心簡(jiǎn)要描述:軒澤康生物提供大鼠P選擇素(P-Selectin)ELISA檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù),快速檢測(cè)一周內(nèi)出結(jié)果。我司ELISA檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品種類齊全,為您提供全面技術(shù)咨詢服務(wù)和產(chǎn)品說(shuō)明書。試劑盒有質(zhì)量問(wèn)題我們無(wú)條件退換。歡迎咨詢、訂購(gòu)!
產(chǎn)品介紹
品牌 | 軒澤康 | 規(guī)格 | 96T,48T |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 僅用于科學(xué)研究,不得用于臨床 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 | 保質(zhì)期 | 6個(gè)月 |
保存條件 | 2-8℃ | 檢測(cè)波長(zhǎng) | 450nm |
種屬齊全 | 人、小鼠、豬、兔等 | 靈敏度 | zui低檢測(cè)濃度小于0.1U/mL |
特色服務(wù) | 免費(fèi)代測(cè) |
【產(chǎn)品用途】:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中大鼠P選擇素(P-Selectin)的含量。凡訂購(gòu)我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù),歡迎咨詢、訂購(gòu)!
【P選擇素(P-Selectin)簡(jiǎn)介】:是相對(duì)分子質(zhì)量為140000的糖蛋白,存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞的Weibe-l Palade 小體膜上及血小板α顆粒膜上,在受到組織胺、凝血mei、佛波酯和鈣離子載體的刺激后,其迅速在質(zhì)膜上表達(dá), 缺氧/再氧化或氧自由基也可誘導(dǎo)表達(dá)。P選擇素凝集素樣區(qū)是配體結(jié)合部位的關(guān)鍵序列,其配體是唾液酸化路易斯( S-Lewis x ) , 高親和力的配體是P選擇素糖蛋白配體1( P-selectin glycoproteinlig and 1, PSGL-1) , 主要表達(dá)于中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞。
檢測(cè)原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被P選擇素(P-Selectin)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的P選擇素(P-Selectin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品活性。
大鼠P選擇素(P-Selectin)ELISA檢測(cè)試劑盒組成:(檢測(cè)范圍請(qǐng)參考說(shuō)明書)
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 品牌 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 軒澤康 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 軒澤康 |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 軒澤康 |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 軒澤康 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 軒澤康 |
底物B | 6mL | 3mL | 軒澤康 |
終止液 | 6mL | 3mL | 軒澤康 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 軒澤康 |
說(shuō)明書 | 1份 | 1份 | 軒澤康 |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 軒澤康 |
大鼠P選擇素(P-Selectin)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:
【試劑盒平衡至室溫】:從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
【標(biāo)準(zhǔn)品加樣】:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。
【加樣】:樣本孔先加待測(cè)樣本 10μL,再加稀釋液40μL;空白孔不加。除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體 100μL。
【溫育】:用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
【洗滌】:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。
【顯色】:每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育15min。
【終止、測(cè)定】:每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD 值。
技術(shù)小提示:
1.當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí),盡量避免起沫。
2. 為了避免交叉感染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽。
3.每次孵育時(shí),請(qǐng)正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4.混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無(wú)色,請(qǐng)避光保存;假如微孔板后,將由物色變成不同深度的藍(lán)色。
5.終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致;加入終止液后,孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體未混勻;請(qǐng)充分混合。
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