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產(chǎn)品中心簡(jiǎn)要描述:人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)ELISA試劑盒效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存。公司提供免費(fèi)酶聯(lián)免疫試劑盒(ELISA試劑盒)代測(cè),快速檢測(cè)一周內(nèi)出結(jié)果用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體等樣本。
產(chǎn)品介紹
品牌 | 軒澤康 | 規(guī)格 | 96T,48T |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 課題研究,科研檢測(cè) |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 | 保質(zhì)期 | 6個(gè)月 |
保存條件 | 2-8℃ | 檢測(cè)方法 | 雙抗體一步夾心法 |
實(shí)驗(yàn)儀器 | 酶標(biāo)儀 | 樣本類(lèi)型 | 血清、血清、組織勻漿、細(xì)胞上清液等 |
靈敏度 | zui低檢測(cè)濃度小于10 pg/mL | 特色服務(wù) | 免費(fèi)代測(cè),支持定制 |
檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:
1. 請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象;放置室溫,輕搖均勻,待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液??蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液,未用完的放回4℃
20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
樣品收集、處理及保存方法:人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)ELISA試劑盒
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品:
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
ELISA實(shí)驗(yàn)中一般需要4次加樣,即加標(biāo)本、加檢測(cè)抗體、加底物和加終止液。實(shí)驗(yàn)室使用的微量加樣器應(yīng)注意保樣并定期校正。ELISA比較敏感,每孔加入液體量誤差會(huì)導(dǎo)致最后讀書(shū)差別,因此避免儀器帶來(lái)誤差。上海軒澤康生物特為您準(zhǔn)備加樣注意事項(xiàng):
1. 加樣前:溶液應(yīng)充分混勻。加樣時(shí)避免90度向孔中滴加液體,否則會(huì)導(dǎo)致液體殘留再吸頭上,從而導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確。正確的加樣方法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。
2. 加樣時(shí):避免速度過(guò)快,否則無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性;避免液體濺出;
3. 加樣品時(shí):?jiǎn)慰子昧恳螅骸?0微升/指標(biāo),如需要做2個(gè)復(fù)孔則血量≥100微升/指標(biāo)。
4. 每次加樣順序一致,尤其底物、終止液順序一致,保證每個(gè)孔顯色時(shí)間相同。
5. 如果移液槍漏氣以至于加樣的量不夠,不能用槍吸出再加,做相應(yīng)記錄實(shí)驗(yàn)。
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