在ELISA檢測過程中時常會有檢測結(jié)果與實際結(jié)果不符的情況出現(xiàn)。主要收到四個因素的影響：

1）  試劑盒原材料（試劑盒質(zhì)量是決定實驗結(jié)果準(zhǔn)確性的必要保障，但由于不同廠家試劑在原材料的選擇上不盡相同，使得ELISA檢測結(jié)果在靈敏度、特異性、穩(wěn)定性和操作簡便性有一定的差異。）

2）  標(biāo)本因素

3）  實驗室環(huán)境

4）  操作因素

人半乳糖凝集素10(Galectin-10)ELISA試劑盒，是僅供科研使用，不用于臨床診斷。試劑盒規(guī)格：48T/盒：可以 檢測42個樣本；96T/盒：可以檢測90個樣本

試劑盒組成及試劑配制：

1. 酶標(biāo)板（Microelisa stripplate）：一塊（96孔或者48孔）

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：0.3ml*6管或者0.3ml*6管

3. 本稀釋液（Sample Diluent）：6ml或者3ml

4. 檢測抗體-HRP（HRP-Conjugate reagent）：10ml或者5ml

5. 20x洗滌緩沖液（20X Wash solution）：25ml或者15ml（按說明書進(jìn)行稀釋）

6. 底物A（Chromogen Solution A）：6ml或者3ml

7. 底物B（Chromogen Solution B）：6ml或者3ml

8. 終止液（Stop Solution）：6ml或者3ml

9. 封板膜（Closure plate membrane）：2張

10. 說明書（User manual）：1份

11. 自封袋（Sealed bags）：1個

人半乳糖凝集素10(Galectin-10)ELISA試劑盒實驗中問題解答：

【檢測的結(jié)果沒有吸光度值或吸光度值很低】

可能造成的原因：1.使用的試劑盒已過有效期 2. 沒有充分回溫、孵育的溫度太低

上海軒澤康生物為您解答：建議更換有效期以內(nèi)的試劑盒，使用同一批次試劑盒內(nèi)的內(nèi)容物并嚴(yán)格按照說明書步驟進(jìn)行操作。在實驗操作的整個過程中仔細(xì)觀察恒溫箱的溫度。

【吸光度值偏高】

可能造成的原因：孵育溫度過高，反應(yīng)時間過長。

上海軒澤康生物為您解答：建議調(diào)整孵育環(huán)境的溫度，如無法調(diào)整室內(nèi)溫度請將顯色時間適當(dāng)縮短，控制反應(yīng)時間。

【標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性不好，雙孔對照孔的OD值差別很大，出現(xiàn)跳孔現(xiàn)象】

可能造成的原因：酶標(biāo)孔間相互污染，洗板后未能盡快進(jìn)行下一步驟、添加樣品或其他試劑時操作的方法不對、孵育位置避光性不佳或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸發(fā)

上海軒澤康生物為您解答：加樣時請小心勿將液體濺入另一孔中。洗板后及時進(jìn)行下一步操作、添加試劑時請懸空滴入，勿將槍頭接觸到板孔內(nèi)。確認(rèn)孵育環(huán)境不透光，蓋板膜將酶標(biāo)板密封好，使用已經(jīng)校正過的微量加樣器。

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